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一代毛細管電泳測序儀

一代毛細管電泳測序

 實驗概述:
一代測序技術是20世紀70年代中期由Fred Sanger及其同事首先發明。
應用領域:
1.DNA測序:從頭測序,靶向 DNA 測序,下一代測序驗證,HLA 測序,微生物測序,線粒體測序
2. 研究領域:癌症研究,遺傳疾病研究,病原體檢測與分析,人類身份鑒定,HLA 分型,食品檢驗等
3. 其他應用:基因表達分析,甲基化分析
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實驗原理

一代毛細管電泳測序儀
實驗原理:
聚丙烯酰胺凝膠電泳能夠把長度隻差一個核苷酸的單鏈DNA分子區分開來。一代測序實驗的起始材料是均一的單鏈DNA分子。第一步是短寡聚核苷酸在每個分子的相同位置上退火,然後該寡聚核苷酸就充當引物來合成與模板互補的新的DNA鏈。用雙脫氧核苷酸作為鏈終止試劑(雙脫氧核苷酸在脫氧核糖上沒有聚合酶延伸鏈所需要的3-OH基團,所以可被用作鏈終止試劑)通過聚合酶的引物延伸產生一係列大小不同的分子後再進行分離的方法。測序引物與單鏈DNA模板分子結合後,DNA聚合酶用dNTP延伸引物。延伸反應分四組進行,每一組分別用四種ddNTP(雙脫氧核苷酸)中的一種來進行終止,再用PAGE分析四組樣品。從得到的PAGE膠上可以讀出我們需要的序列。

實驗操作指引

一代毛細管電泳測序
  1. DNA碎片化:
  首先要將提取得到的樣品完整DNA打碎,形成DNA片段,如隻是測定單個目的基因的序列,則無需進行DNA碎片化。
  2. PCR擴增和體外克隆:
  針對特定目的核酸片段的測序,首先要對目的測序區域進行PCR擴增;而針對碎片化DNA的測序,則要將碎片化的DNA片段通過克隆的方式連接到質粒載體中;對於部分PCR產物的測序也可以對其進行克隆,以保證測序樣品的純度和濃度。
  3. ddNTP法循環測序:
  向得到的待測樣品中分別加入4種dNTP和4種ddNTP,從而得到不同位置匹配終止的序列。
  4. 凝膠電泳獲得序列:
  對得到的序列進行凝膠電泳,根據堿基的順序和位置確定序列信息。

四大優勢

專業實驗室

科潤達生物擁有P2級實驗室及GMP車間,嚴格按食藥監械監2015-218號令醫療器械生產質量管理規範體外診斷試劑現場檢查指導原則的相關要求管理。

學術態度嚴謹

國家注冊檢驗師帶領的實驗團隊,嚴格落實檢驗操作每一處細節,實驗標準品定期更新,定期與外部實驗室做實驗數據比對等,確保實驗數據的嚴謹。

數據客觀準確

科潤達生物為您配備了有著二十多年免疫專業和經驗豐富的技術團隊,可以為您提供客觀真實的實驗數據,並承諾所用的檢測試劑均為優質的原裝進口產品。

服務高效快捷

科潤達生物以客戶服務為導向,實驗室管理體係與業務接口無縫對接,確保用戶需求及時得到分析評價、可以為用戶分析測試結果、協助用戶解決技術問題

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